Tėkmės citometrija: kas tai yra?
Tėkmės citometrija yra pažangi laboratorinė technika, naudojama ląstelių ir jų komponentų analizavimui. Šis metodas leidžia greitai išmatuoti ir išanalizuoti milijonus atskirų ląstelių per labai trumpą laiką. Tėkmės citometrija dažniausiai naudojama medicinoje ir moksliniuose tyrimuose, siekiant nustatyti ląstelių tipą, dydį, formą, paviršiaus žymenis bei vidinius ląstelių baltymus. Ši technika ypač svarbi imunologijoje, onkologijoje ir hematologijoje, nes padeda tiksliai diagnozuoti tam tikras ligas ir įvertinti jų eigą.
Tėkmės citometrijos metu ląstelės praleidžiamos per lazerio spindulį viena po kitos, o lazerio šviesos sklaida ir fluorescencinis signalas (naudojant žymenis) leidžia identifikuoti ląstelių ypatybes. Tėkmės citometrija taip pat naudojama ląstelių skaičiavimui, jų subpopuliacijų identifikavimui, DNR turinio ir apoptozės nustatymui.
Kaip veikia tėkmės citometrija?
Tėkmės citometrijos veikimo principas remiasi tuo, kad individualios ląstelės praleidžiamos per lazerio spindulį, o lazerio šviesa sąveikauja su ląstelėmis, suteikdama informaciją apie jų dydį, struktūrą ir fluorescencinius žymenis, jei jie naudojami. Procesas vyksta taip:
- Mėginio paruošimas: ląstelės paimamos iš paciento kraujo, kaulų čiulpų, kūno skysčių ar audinių. Prieš analizuojant, jos dažnai pažymimos specialiais fluorescenciniais žymenimis, kurie gali prisijungti prie specifinių ląstelių paviršiaus baltymų.
- Ląstelių tėkmė: mėginys praleidžiamas per siaurą kanalą, kuriame ląstelės išdėstomos viena po kitos. Šios ląstelės praeina per lazerio spindulį.
- Lazerio spindulys: kai lazerio šviesa sąveikauja su ląstele, šviesos sklaida ir fluorescencinis signalas užfiksuojami detektoriais. Signalai naudojami nustatyti ląstelės dydį, struktūrą, granuliuotumą, paviršinius baltymus ar kitas ląstelės savybes.
- Signalų analizė: kompiuterinė sistema analizuoja šviesos sklaidą ir fluorescenciją, identifikuodama ir skaičiuodama ląsteles bei jų subpopuliacijas.
Kokios ligos diagnozuojamos naudojant tėkmės citometriją?
Tėkmės citometrija yra labai naudinga įvairioms ligoms diagnozuoti ir stebėti, ypač toms, kurios susijusios su imuninės sistemos ir kraujo ląstelių funkcijomis:
- Leukemija ir limfoma: tėkmės citometrija leidžia identifikuoti piktybines kraujo ląsteles, nustatyti leukemijos ir limfomos tipą bei įvertinti ligos progresą.
- Imunodeficito ligos: tyrimas padeda nustatyti imuninių ląstelių (pvz., T, B limfocitų, NK ląstelių) sutrikimus, kurie gali būti susiję su įgimtomis ar įgytomis imunodeficito ligomis, pavyzdžiui, ŽIV/AIDS.
- Autoimuninės ligos: tėkmės citometrija padeda aptikti autoimuninius sutrikimus, kai imuninės ląstelės atakuoja paties organizmo audinius.
- Kraujo ląstelių analizė: technika gali būti naudojama tiksliai identifikuoti kraujo ląstelių tipus (pvz., eritrocitus, leukocitus, trombocitus) ir nustatyti jų subpopuliacijas.
Kokia norma turi būti tėkmės citometrijos tyrimo rezultatai suaugusiam?
Tėkmės citometrijos tyrimo rezultatai priklauso nuo to, kokie konkretūs ląstelių tipai ar baltymai yra analizuojami. Pavyzdžiui:
- CD4+ T limfocitų skaičius: sveiko suaugusio žmogaus kraujyje normos ribos yra apie 500–1500 ląstelių/µl. CD4+ ląstelių skaičius ypač svarbus vertinant imunodeficitą, pvz., ŽIV infekcijos atveju.
- CD8+ T limfocitai: normos ribos suaugusiems yra apie 150–1000 ląstelių/µl. Šios ląstelės yra svarbios kovojant su virusinėmis infekcijomis ir vėžinėmis ląstelėmis.
Kiekvienas tyrimas ir rezultatų interpretacija priklauso nuo ligos pobūdžio ir gydytojo paskirtų tyrimų tikslų.
Kokia norma turi būti tėkmės citometrijos tyrimo rezultatai vaikui?
Vaikams tėkmės citometrijos rezultatai taip pat priklauso nuo analizuojamų ląstelių tipo ir tiriamos ligos. Normos ribos gali šiek tiek skirtis priklausomai nuo amžiaus ir vystymosi etapo. Pavyzdžiui:
- CD4+ T limfocitai: naujagimių ir kūdikių CD4+ ląstelių skaičius gali būti didesnis nei suaugusiųjų, dažniausiai 1500–5000 ląstelių/µl.
- CD8+ T limfocitai: vaikams šios ląstelės gali sudaryti didesnę imuninės sistemos dalį nei suaugusiems, normos ribos yra 800–2200 ląstelių/µl.
Vaikų imuninė sistema yra aktyvesnė ir vystymosi stadijoje, todėl tėkmės citometrijos rezultatai gali skirtis nuo suaugusiųjų.
Ką rodo pakitimai tėkmės citometrijos rezultatuose suaugusiam?
Tėkmės citometrija gali parodyti įvairius pakitimus, priklausomai nuo ligos:
- Padidėjęs arba sumažėjęs imuninių ląstelių skaičius: pavyzdžiui, ŽIV infekcija sumažina CD4+ ląstelių skaičių, o leukemija gali padidinti tam tikrų baltųjų kraujo kūnelių skaičių.
- Nenormalios ląstelės: tėkmės citometrija gali aptikti piktybines ląsteles, kurios nurodo vėžinius ar priešvėžinius procesus.
- Autoimuniniai pokyčiai: tėkmės citometrija gali padėti diagnozuoti autoimunines ligas, kai imuninė sistema atakuoja paties organizmo ląsteles.
Ką rodo pakitimai tėkmės citometrijos rezultatuose vaikui?
Vaikams tėkmės citometrija gali parodyti įvairius imuninių ląstelių sutrikimus ar vėžinius procesus:
- Pirminis imunodeficitas: tėkmės citometrija padeda aptikti įgimtus imunodeficito sutrikimus, kai imuninė sistema gamina nepakankamą imuninių ląstelių skaičių.
- Leukemija ar limfoma: šios ligos gali pasireikšti dideliu nenormalių kraujo ląstelių kiekiu, kurį aptinka tėkmės citometrija.
Šaltiniai
- https://my.clevelandclinic.org/health/diagnostics/22086-flow-cytometry
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5939936/