Preparatų dažymas Gramo būdu
Preparatų dažymas Gramo būdu kas tai yra?
Gramo dažymo metodas – tai laboratorinis bakterijų dažymo būdas, kuris padeda atskirti bakterijas į dvi pagrindines grupes: gramteigiamas (Gram-pozityvias) ir gramneigiamas (Gram-negatyvias). Šis metodas buvo sukurtas 1884 m. danų mokslininko Hanso Christiano Gramo ir iki šiol plačiai naudojamas mikrobiologijoje kaip greita ir veiksminga bakterijų diferenciacijos technika.
Gramo dažymo metu bakterijos nudažomos keliais skirtingais dažais, kurie paryškina jų ląstelių sienelių struktūras ir leidžia jas atskirti pagal spalvą. Šis metodas padeda greitai nustatyti, kokio tipo bakterijos yra tiriamoje mėginyje, ir yra naudingas pirminei infekcijos diagnostikai bei antibiotikų parinkimui.
Gramo dažymo proceso etapai
- Kristalvioleto dažymas – mėginys pirmiausia dažomas kristalvioletu, kuris nusidažo visą bakterijų paviršių.
- Jodo tirpalas – užtepamas jodo tirpalas, kuris fiksuoja kristalvioletą bakterijų ląstelėse, sudarydamas kompleksus su bakterijų sienelėmis.
- Alkoholio arba acetono plovimas – mėginys nuplaunamas alkoholiu arba acetonu. Šis žingsnis yra esminis, nes jis leidžia atskirti bakterijas pagal jų sienelių struktūrą:
- Gramteigiamos bakterijos išlaiko kristalvioleto ir jodo kompleksą, nes jų sienelė yra stora ir nepraleidžia dažų.
- Gramneigiamos bakterijos netenka violetinės spalvos, nes jų sienelė yra plonesnė, o alkoholio arba acetono poveikis išplauna kristalvioletą.
- Safranino arba fuksino dažymas – galutinis dažymas atliekamas safraninu arba fuksinu, kurie nudažo gramneigiamas bakterijas rausvai arba raudonai, o gramteigiamos bakterijos lieka violetinės.
Gramo dažymo rezultatų interpretacija
- Gramteigiamos bakterijos: dažomos violetine spalva, nes jų ląstelių sienelė yra stora ir išlaiko pirminį kristalvioletą. Gramteigiamos bakterijos dažniausiai yra Staphylococcus, Streptococcus, Bacillus, Clostridium ir kitos.
- Gramneigiamos bakterijos: dažomos rausvai arba raudonai, nes jų ląstelių sienelė yra plona ir alkoholio/acetono plovimo metu praranda pirminį dažą. Gramneigiamos bakterijos dažniausiai yra Escherichia coli, Salmonella, Neisseria, Pseudomonas ir kitos.
Gramo dažymo metodo svarba
Gramo dažymo metodas yra vienas iš pagrindinių ir pirmųjų laboratorinių žingsnių bakterijų identifikavimo procese, nes jis:
- Leidžia greitai nustatyti, kokio tipo bakterijos yra mėginyje (gramteigiamos ar gramneigiamos).
- Padeda numatyti galimus infekcijos šaltinius ir pasirinkti tinkamą antibiotiką, nes gramteigiamoms ir gramneigiamoms bakterijoms veikia skirtingi antibiotikai.
- Yra paprastas ir greitas metodas, kuris leidžia klinikinei laboratorijai pradėti orientacinę diagnostiką, net jei nėra atlikta išsami bakterijų kultūros analizė.
